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實驗室移液槍的正確使用方法指南
移液槍使用訣竅
移液槍是實驗操作上的工具,對于頂尖高手而言,重要的就是實驗的誤差最小,重復再現(xiàn)性好,那就要注意正確移液槍使用。
1.影響移液槍精度因素
(1)溫度:室溫低時,手溫較高,使得空氣膨脹,吸入冷溶液時往往發(fā)生誤差
(2)氣密性:tip和槍體的結合部,以及槍內(nèi)柱體之間的長期磨損,造成誤差
(3)吸速:容易造成tip內(nèi)氣泡產(chǎn)生,而且會污染槍頭
(4)試劑的揮發(fā):吸揮發(fā)性高的試劑時,蒸汽進入槍頭,內(nèi)壓增高,結果在壓出液體時,壓力變大,而產(chǎn)生誤差。解決辦法:反復抽吸4-5次就可改善。
2.具體使用方法
更換tip法:準確。
(1)調(diào)節(jié)旋鈕到所需刻度位置,訣竅:首先可略超過一些,再回旋至刻度。注意禁止超過最大刻度,避免人為誤差。
(2)插上tip:無菌操作時,要注意動作迅速正確,不能用手碰tip,動作的力度要保持一致,禁止廢動作。普通操作時,可用拇指食指上緊,但手不能碰tip尖處。
(3)指壓到第一段,tip尖接觸試劑。白色tip進到液面1mm一下,黃色tip2-3mm,藍色tip2-4mm,避免液壓的影響造成的誤差。儀器耗材
(4)緩慢吸試劑,禁止速度過快,液體進入槍頭。
(5)移出tip后,先在容器內(nèi)壁輕輕靠住,使tip外壁液體流下。
(6)將tip貼在目標容器內(nèi)壁,輕輕按到第一段,壓出液體。
(7)tip尖在容器內(nèi)壁略上滑動,保留尖少量液體,移出目標容器,手指卸掉tip,注意不要使試劑濺出。
(1)同上述A-D,移出液面后,先緩慢按到第一段,在用力按到第二段,將試劑全壓出。
(2)同上述C,緩慢吸出液體。
(3)在目標容器液體上空,壓出試劑到第二段,注意壓的力度要和A相同,還應注意試劑不要四處飛濺。
(4)緩慢返回第一段,可重復上述操作。達到目標容器原有液體不污染tip的目的。
轉(zhuǎn)移數(shù)ul的貴重試劑時的方法:
(1)同上述A-D,移出液面后,在容器內(nèi)壁輕按幾下,使外壁液體流下。白色tip進到液面1mm以下,這最重要。
(2)tip尖浸入目標容器的液面下,緩慢壓到第一段。
(3)松開,返回到第一段,重新吸入液體,反復4-5次,,洗凈tip內(nèi)壁液體。
(4)將tip尖移出液面,在內(nèi)壁輕輕靠住,壓出液體到第二段。
移液九部曲
1.裝吸頭
移液器套柄用力下壓,需要時小幅度旋轉(zhuǎn)即可。
錯誤操作:用力敲擊吸頭。此方法會帶來吸頭損壞甚至移液器套柄磨損,從而影響其密封性。
2.量程設定
操作之前請先選擇正確的移液器,移液器可在10-100%量程范圍內(nèi)操作,但在10%量程處操作對于移液技巧要求高,故推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。
量程調(diào)節(jié):當由小量程調(diào)節(jié)至大量程時,朝所需量程方向連貫旋轉(zhuǎn),旋轉(zhuǎn)到達超過所需量程1/3圈處再回調(diào)至所需量程。當由大量程調(diào)節(jié)至小量程時,直接連貫旋轉(zhuǎn)至所需量程。
3.潤洗
用同一樣品重復吸液排液二至三次,潤洗為以后每次吸液提供相同的接觸面,保證操作的一致性。
注意:高溫或者低溫液體請不要潤洗!
4.吸頭浸入角度
吸液時盡量保持垂直狀態(tài),傾斜角度不能超過20°。
5.吸頭浸入深度
6.吸頭浸入時間
吸液后在液面中保持一秒鐘再將吸頭平緩移開,這對于大容量移液器或者吸取粘性樣品尤為重要。
7.吸液速度
勻速連貫移液,控制好移液速度,太快會造成噴液,液體或者氣霧沖入移液器內(nèi)部,污染活塞等部件。
8.排液及吹液
先將活塞按至第一檔排液,略作停頓后按至第二檔進行吹液。
排液四種方式:
9.手溫
移液器不宜長時間握在手里,不用時最好將其掛在支架上或者掛在手上晾一下。
移液器使用注意事項:
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
(2)為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜",造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
(3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設定。
(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20℃時重0.9982g。
(5)移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。
(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。
(7)在設置量程時,請注意?旋轉(zhuǎn)到所需量程?數(shù)字清清楚楚在顯示窗中?所設量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝置,損壞了移液器。
(8)移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如,濃酸、濃堿、有機物等)。
(9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。
(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作。
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