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本生為您詳解配制培養(yǎng)基培養(yǎng)液時(shí)應(yīng)注意事項(xiàng)
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代理許多先*水平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。
?、?在使用提前配制的母液時(shí),應(yīng)在量取各種母液之前,輕輕搖動(dòng)盛放母液的瓶子,如果發(fā)現(xiàn)瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染,應(yīng)立即淘汰這種母液,重新進(jìn)行配制;
?、?用量筒或移液管量取培養(yǎng)基母液之前,必須用所量取的母液將量筒或移液管潤(rùn)洗2次;
?、?量取母液時(shí),將各種母液按將要量取的順序?qū)懺诩埳希咳?種,劃掉1種,以免出錯(cuò)。溶化瓊脂 用粗天平分別稱取瓊脂9 g、蔗糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸餾水750 mL;
用電爐加熱,邊加熱邊用玻璃棒攪拌,直到液體呈半透明狀。然后再將配好的混合培養(yǎng)液加入到煮沸的瓊脂中,zui后加蒸餾水定容至1 000 mL,攪拌均勻。
培養(yǎng)基的分裝 溶化的培養(yǎng)基應(yīng)該趁熱分裝。分裝時(shí),先將培養(yǎng)基倒入燒杯中,然后將燒杯中的培養(yǎng)基倒入錐形瓶(50 mL或100 mL)中。注意不要讓培養(yǎng)基沾到瓶口和瓶壁上。
錐形瓶中培養(yǎng)基的量約為錐形瓶容量的1/5~1/4。每1 000 mL培養(yǎng)基,可分裝25~30瓶。培養(yǎng)基分裝完畢后,應(yīng)及時(shí)封蓋瓶口。
用2塊硫酸紙(每塊大小約為9 cm×9 cm)中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口,并用線繩捆扎。zui后在錐形瓶外壁貼上標(biāo)簽。
需要注意的是,在加熱瓊脂,制備培養(yǎng)基的過程中,操作者千萬(wàn)不能離開,否則沸騰的瓊脂外溢,就需要重新稱量、制備。此外,如果沒有搪瓷量杯,可用大燒杯代替。
但要注意大燒杯底的外表面不能沾水,否則加熱時(shí)燒杯容易炸裂,使溶液外溢,造成燙傷。調(diào)pH 用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培養(yǎng)基中,邊滴邊攪拌,并隨時(shí)用精密的pH試紙(5.4~7.0)測(cè)培養(yǎng)基的pH,一直到培養(yǎng)基的pH為5.8為止(培養(yǎng)基的pH必須嚴(yán)格控制在5.8)。
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