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對(duì)于ELISA試劑盒變質(zhì)的原因您知道多少?
在ELISA實(shí)驗(yàn)中我們經(jīng)常會(huì)碰到試劑盒變質(zhì)的問(wèn)題,是什么原因?qū)е铝薊LISA試劑盒的變質(zhì)呢?接下來(lái)BUNSEN本生就和大家說(shuō)一說(shuō)導(dǎo)致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因有哪些。
導(dǎo)致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因主要分為七種:
1、方法學(xué)的影響
ELISA測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。
2、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難bao證質(zhì)量一致,即使是通過(guò)批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也會(huì)存在差異,因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑,并bao證保存條件。 嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過(guò)程,并且能夠bao證結(jié)果的穩(wěn)定性;對(duì)于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
3、樣本因素
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
4、操作因素
ELISA操作步驟復(fù)雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
5、灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下,ELISA定性實(shí)驗(yàn)以“陽(yáng)性”和“陰性”來(lái)報(bào)告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽(yáng)性判斷值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測(cè)定結(jié)果報(bào)告的依據(jù)。
6、標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復(fù)查力度是bao證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法。
7、表示結(jié)果的常用方法
?、?定性測(cè)定。
?、?半定量測(cè)定,結(jié)果一般以滴度表示。
?、?定量測(cè)定,即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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